Azin1-A1099T-G1100C条件性点突变小鼠肿瘤模型

Azin1基因编码的蛋白属于抗酶抑制剂（AZIN）家族，通过维持细胞内多胺稳态，在细胞生长和增殖中发挥作用。AZIN是鸟氨酸脱羧酶(ODC，多胺生物合成的关键酶)的同源物，保留了对抗酶的亲和力，但失去了催化活性。抗酶通过与ODC结合并靶向降解，以及抑制多胺摄取，负向调节细胞内多胺水平；而AZIN通过隔离抗酶并中和它们的作用来发挥多胺水平的正向调节作用。哺乳动物中含有两种独立进化的AZIN同源物，AZIN1和AZIN2；其中AZIN1定位于细胞核和细胞质。Azin1的过表达与细胞增殖、细胞转化和肿瘤发生有关。对Azin1基因进行敲除实验表明，基因敲除纯合小鼠出生时死亡，肝脏形态异常。Azin1基因的RNA编辑主要在肝组织中，与肝细胞癌的进展有关；与慢性病毒性肝炎（乙肝和丙肝）的肝纤维化和肝硬化进程有相关性。对Azin1进行条件性定点突变得到的小鼠并未出现致死等症状，适合研究Azin基因功能。

采用Cas9进行突变基因定点敲入。

（1）引物信息：鉴定引物序列

（2）PCR条件：

Azin1的过表达与细胞增殖、细胞转化和肿瘤发生有关。Azin1基因的RNA编辑主要在肝组织中，与肝细胞癌的进展有关；与慢性病毒性肝炎（乙肝和丙肝）的肝纤维化和肝硬化进程有相关性。对Azin1进行条件性定点突变得到的小鼠并未出现致死等症状，适合研究Azin基因功能。

该小动物模型饲养在清洁级动物中，微生物处于监控状态，动物房有相应的保护措施，小鼠不会出现逃逸，不会对外界环境造成影响。