脑特异表达的CYP2E1转基因大鼠

阿尔茨海默病(Alzheimer disease , AD) 是一种常见的中枢神经系统进行性的退行性疾病，临床表现为进行性记忆减退和认知障碍，我国65岁以上老人痴呆症的发病率为5.56%。

CYP2E1基因编码一个细胞色素P450超家族的酶。细胞色素P450蛋白是一种单加氧酶，对药物代谢和胆固醇、甾体和其他脂类的合成进行催化。CYP2E1蛋白定位于内质网，由乙醇、糖尿病状态和饥饿诱导。该酶既代谢内源性底物，如乙醇、丙酮和缩醛，也代谢外源性底物，包括苯、四氯化碳、乙二醇和亚硝胺。CYP2E1酶的底物多样，因此可能参与糖异生、肝硬化、糖尿病和癌症等多种过程。氧化应激、能量代谢是AD的发病机制之一，因此CYP2E1可能对于AD的病理发展具有调节作用。

PDGF启动子下游插入CYP2E1的cDNA构建脑特异过表达载体，显微注射获得转基因大鼠。

获得首建鼠后，7日内剪尾，提取基因组DNA，PCR鉴定基因型如图2。首建鼠与野生大鼠杂交，得到子代大鼠，牺牲分离脑组织提取蛋白进行western blot鉴定，如图3结果显示：CYP2E1在脑的海马和皮层表达均高于野生对照大鼠。

本实验采用健康成年SPF级老鼠。饲料垫料均为高压灭菌产品，购自北京维通利华实验动物有限公司，动物用水均经过除菌处理。实验动物以完整的包装直接进入实验室，观察适应5天后无异常情况，方进行实验。实验过程中动物操作均符合动物伦理学规范，对环境和生态影响等符合国家相关法律规定。

CYP2E1与氧化应激、代谢相关，该转基因动物可以用于阿尔茨海默病的发病机制研究。