人结直肠癌细胞HCT-116红色荧光标记BALB／cA-nu裸小鼠模型

结直肠癌是常见的恶性肿瘤，包括结肠癌和直肠癌。结直肠癌癌的发病率从高到低依次为直肠、乙状结肠、盲肠、升结肠、降结肠及横结肠，近年有向近端（右半结肠）发展的趋势。其发病与生活方式、遗传、大肠腺瘤等关系密切。

最早期可有腹胀、不适、消化不良样症状，其中右半结肠癌时，多为腹痛不适或隐痛。当右半结肠癌时表现为早期粪便稀薄，有脓血，排便次数增多，当结肠癌的癌肿继续增大影响到粪便的通过时还可出现交替出现的腹泻与便秘，而左半结肠癌则多表现为排便困难，并随结肠癌的病情发展而不断加重。腹部包块为瘤体或与网膜、周围组织浸润的肿块，质硬，形体不规则，有的可随肠管有一定的活动度，晚期时肿瘤浸润严重，肿块可固定。肠梗阻表现为不全性或完全性低位肠梗阻症状，如腹胀，腹痛，便秘或便闭。结肠肿瘤的常见症状是体检可见腹隆、肠型、局部有压痛，并可闻及亢进的肠鸣音。左半结肠肠腔相对狭小，粪便至此已粘稠成形，且该部多为侵润型癌，肠腔环状狭窄，因此较早出现肠梗阻症状。由于结肠癌的肿瘤溃烂失血和毒素吸收，常可导致结肠癌患者出现贫血、低热、乏力、消瘦、浮肿等症状，其中尤以贫血、消瘦为著。右半结肠血运及淋巴丰富，吸收能力强，癌肿多为软癌，易溃烂、坏死致出血感染，因此以中毒症状为主。晚期有黄疸、腹水、浮肿等肝转移征象，以及恶病质，直肠前凹肿块，锁骨上淋巴结肿大等肿瘤远处扩散转移的表现。

BALB／cA-nuBALB/cA-nu小鼠，胸腺缺失，为第11对染色体隐性遗传，T细胞免疫缺陷，B细胞正常，具有较高的NK细胞活力，无接触敏感性，无移植排斥反应。

人结直肠癌细胞（HCT116）是1979年M.Brattain等从患结肠癌的男性病人中分离的三株恶性结直肠癌细胞系之一，形成上皮样的肿瘤，转染稳定高表达DsRed的细胞，在荧光显微镜下呈强荧光，并且荧光较均匀的分布于整个细胞内。细胞形态和未转染细胞无明显区别。

图1红色荧光标记的HCT-8细胞系模型制作采用BALB／cA-nu裸小鼠，鼠龄5周，体重15—18 g，裸小鼠在实验室无特定病原体饲养间饲养。收集处于生长对数期的DsRed标记的HCT116肿瘤细胞，稀释至5×106cells／mL。取200μL细胞悬液进行皮下接种。

在接种的7、14、21、28、35d观察肿瘤的生长情况。在接种的第7天就可以观察到肿瘤荧光，通过肿瘤组织发出的荧光的光子数确定肿瘤的大小，随着观察天数的增加，肿瘤的体积和发光强度增加，且具有很好的相关性(图1)。以肿瘤细胞发射的光子数对小鼠荷瘤时间作图得到红色荧光蛋白标记的肿瘤细胞在裸鼠体内的生长曲线（图2）。

图1.皮下接种CT-116-DsRed肿瘤生长影像分析

图2.红色荧光标记肿瘤的生长曲线

该小动物模型饲养在清洁级动物中，微生物处于监控状态，动物房有相应的保护措施，小鼠不会出现逃逸，不会对外界环境造成影响。